Cytokine-Release-Assays (CYRA)

(auch Leukozytentransformationstest,

Lymphozytenstimulationstest, TTL, LST etc.)

Elispot

^{(Enzyme-Linked Immuno-Spot-Assay)}

ITT

^{(Immuntoleranztest oder Immun-Target-Test)}

IGRA

^{(IFN-Gamma-Release-Assay)}

MZRA

^{(Multi-Zytokin-Release-Assay)}

Read Out

DNA-Neusynthese anhand Einbaurate von Tritium-markiertem Thymidin

Zytokinsekretion auf Einzelzellniveau, häufig IFN-gamma, auch andere Zytokine möglich

IFN-gamma-Sekretion im Überstand

Zytokinsekretion im Überstand (IL-2, IFN-gamma, IL-10, TNF-alpha, IL-1 und ggf. auch andere)

Inkubationszeit

5–7 Tage

24–48 h

24–48 h

24–48 h

Ausgangsmaterial

NH-Blut

NH-Blut

NH-Blut

NH-Blut

In-vitro-Ansatz mit

isolierten PBMCs

isolierten PBMCs

Vollblut

Vollblut

Ergebnis

SI (Stimulationsindex), Verhältnis von Tritium-Einbaurate in der stimulierten Kultur zur Basalkultur

Frequenz an Zytokin-sekretierenden Zellen

pg/ml IFN-Gamma

pg/ml Zytokine

Aussage

Zellproliferation nach 5–7 Tagen

Frequenz an initial reagierenden Zellen

Initiale IFN-gamma-

Sekretion, quantitativ

Initiale Zytokinsekretion, quantitativ

Nachweis v. Gedächtniszellantworten

ja

ja, wenn IL-2 mit erfasst wird

nein, primär TH1-Effektor­antwort

ja, über IL-2

Nachweis v. Effektorzellantworten

nein

ja (TH1, auch andere möglich)

ja, TH1

ja (TH1, Treg, TH2, ggf. auch TH17, Monozyten)

Stimulanzien/Antigene

Recall-Antigene, Xenobiotika (Medikamente, Umweltschadstoffe), Metalle, Infektionserreger, Nahrungsmittel

Recall-Antigene, Xenobiotika (Medikamente, Umweltschadstoffe), Metalle, Infektionserreger

Mycobacterium tuberculosis, spezifische Antigene

Recall-Antigene, Xenobiotika (Medikamente, Umweltschadstoffe), Metalle, Infektionserreger

Anwendungen

Überprüfung der zellulären Immunfunktion nur auf T-Gedächtniszellebene, Nachweis von Medikamenten­sensibilisierungen, Typ-IV-Sensibilisierungen, Nachweis von T-Gedächtniszellen gegenüber Infektionserregern und Nahrungsmitteln

Vielfältige Anwendungen je nach Antigen und Zytokin-Read-out von zellulärer Immunfunktion bis zu Infektionsnachweis TBC über die IFN-gamma-Induktion aus T- und NK-Zellen (T-Spot)

Spezielle Anwendung als Infektionsnachweis von TBC über die IFN-gamma-Induktion aus T- und NK-Zellen

Überprüfung der zellulären Immunfunktion von T-Gedächtnis- und Effektorzellen sowie Monozyten, Nachweis und entzündliches Potenzial von Medikamenten-Sensibilisierungen bzw. anderen immunologischen Sensibilisierungen, Gedächtnis- und Effektorantwort (Immunkompetenz) gegenüber Infektionserregern